微生态失衡与炎症性肠病

    多项IBD 患者肠道菌群的分析研究具有一些共同特征 。早期研究采用粪便培养、细菌分离技术发现CD、UC 和袋囊炎患者厌氧菌浓度增加,而对照组不增加。研究还发现CD患者E.coli 数量增加,而CD、UC 和袋囊炎患者肠道益生菌数量明显减少。

    目前,肠道菌群研究存在以下问题:第一,大多数研究虽然采用细菌生物学技术如聚合酶链反应(PCR) 、原位杂交、流式细胞术、DNA 探针微序列测定以及基因芯片分析技术等,但不可能完成庞大的肠道细菌研究,仅能分离约30 %的肠道菌群。16SrRNA 探针技术有望提高细菌检测率 。第二,CD患者肠道细菌种类繁多,多属于不正常菌属。即使是正常个体也有多达70 %的肠道细菌未能分类。所以哪些菌种与IBD 的关系密切尚不清楚。第三,应该区分肠黏膜菌丛和粪便菌丛,因为两者的菌种完全不同。它们之间的差异在IBD 发病中可能具有重大意义。推测IBD 与针对黏膜相关细菌的免疫应答反应失调有关。IBD 患者粪便培养和肠黏膜菌群分析显示厌氧菌和E.coli 菌比例显著增加,而双歧杆菌比例显著降低。Schult sz 等采用16SrRNA 探针技术结合原位非荧光杂交技术发现,大部分UC 肠黏膜增加的细菌定植于直肠黏膜层。Swidsinski 等研究了UC 和CD 稠厚黏膜层细菌,发现黏膜细菌浓度CD 高于UC ,回肠高于结肠。通过同步细菌群分析、并用定量PCR 技术以及荧光原位杂交技术分析发现50 %的CD 主要菌种为E.coli或拟杆菌。Kleessen 等用16S rRNA 探针发现UC与CD 存在不同的肠黏膜相关菌种。Schult sz 等及Swidsinski 等在对照组样本中却未发现细菌定植,也未发现入侵细菌与黏膜炎症程度之间的相关性。相反,Kleesen 等研究却发现对照样本中细菌种类增加,且黏膜炎症愈重,细菌种类愈多。各家研究结果的不同原因可能是病例选择不同、以及采用的研究手段不同所致。

    为了解肠黏膜免疫系统对细菌的免疫反应,对IBD 患者肠黏膜组织和血清学的特异性抗体和T细胞亚系进行了研究.Furrie 等对从IBD 分离的35 种肠道细菌的免疫反应进行了同步定量分析研究,结果UC 对消化链球菌属非产气菌的免疫反应产生的抗体明显增高,而与此对应的是结肠黏膜中消化链球菌属非产气菌数量也增加。同样,Lander s等进行了一项CD 大样本研究,目的是探讨选择性细菌抗原和免疫反应的一致性,发现对4 种细菌抗原的血清学反应的比例和类型不同,故推测这些抗体与黏膜细菌的组成以及微生态失衡情况呈对应关系。

    益生菌和益生元治疗IBD 的研究方兴未艾。动物模型的研究阐明了共生菌对黏膜免疫功能和黏膜完整性的作用。但是目前尚无好的随机对照临床实验应用于IBD 治疗。以往研究曾将袋囊炎作为微生态失衡的指标,VSL # 3 可预防袋囊炎的发生和发展及CD 袋囊炎的复发。

    “有害菌”加重IBD 炎症和“有益菌”减缓炎症保护黏膜的作用机制现在还不清楚。拟杆菌和梭状菌属菌种具有产生肠毒素及水解蛋白的特性, 使黏膜通透性加大, 细菌繁殖增多。UC 和袋囊炎患者细菌代谢产生的硫化物具有害作用。硫化氢可阻止肠上皮细胞利用短链脂肪酸,而短链脂肪酸是结肠细胞的营养物质。然而,DSS 结肠炎模型显示硫化物在发病中并未起重要作用 。另外一些研究将兴趣集中在探究肽聚糖、脂多糖和细菌Cp G DNA 上。研究发现具有黏附力和侵袭力的E.coli 常定植于CD 的回肠病变部位。这些细菌似乎具有各种毒力,如定植肠黏膜的能力、穿过上皮屏障的能力、与上皮内巨噬细胞相互作用的能力,以及诱导感染的上皮细胞和巨噬细胞合成促炎因子的能力等。